斑马鱼显微注射技术
采用斑马鱼做为模型的一个突出优点是对它们进行遗传操作非常方便,对它们的早期胚胎进行显微注射即可。通过这种技术,含有遗传物质或者沉默表达框架的的溶液会被注入囊胚细胞:它们是位于新受精卵卵黄上方的胚胎细胞。将遗传物质导入细胞质一般是通过直接注射囊胚细胞,或者先注入卵黄再通过细胞质的自然流动导入囊胚细胞。成功的遗传学操作会带来一定数量的胚胎表型,用于阐明其发育的遗传学机制。
本短片介绍了斑马鱼胚胎的显微注射。我们将先回顾该技术的基本工具,包括注射装置和显微注射器,它可以通过空气压力脉冲来控制液体的流动。然后会阐述重要的准备工作,例如灌制琼脂板,用以在注射过程中稳定胚胎,以及校正显微注射装置。接下来我们会展示显微注射过程包括什么时候在什么部位注射等实验技巧。最后,我们会讨论显微注射技术的应用,包括通过mRNA注射获得基因过量表达,通过注射反义吗啉环寡核苷酸来沉默基因,以及利于经过特殊基因工程操作的质粒DNA产生转基因斑马鱼。
膜片钳电生理技术
神经元细胞膜上有离子通道,它们控制电荷流入和流出细胞,从而调节神经元激发。一种用于研究这些通道的生物物理学特性的极为有用的技术被称为膜片钳记录。在这种方法中,神经科学家把抛光的玻璃微吸管置于细胞上通过吸力形成高电阻封接。这个过程分隔了一小"片"包含一种或多种离子通道的膜。通过微吸管中的电极,研究人员可以"钳制"或控制膜的电属性,这对分析通道活动很重要。该电极还能记录跨膜电压的变化,或离子通过膜的流动。
本短片首先回顾了膜片钳电生理学的原理,介绍了必要的设备,描述了各种类型的膜片钳测量模式,其中包括全细胞式,细胞粘附式,穿孔式,内翻外式和外翻外式膜片钳。接下来,概述了一个典型的全细胞膜片钳实验的关键步骤,并做了电流-电压(IV)曲线。最后,我们提供了膜片钳记录的应用以演示如何在当今的神经生理学实验室里评估离子通道的生物物理学特性,细胞的兴奋性,和神经活性化合物。
下载生物谷APP,观看行云学院视频,让播放更流畅,使用更快捷!
生物谷APP,每天都有新资讯,每天都有好视频!
官方下载地址:http://www.medsci.cn/m/
生物技术的职业生涯
Dr. Tessier-Lavigne is Executive Vice-President of Research and Chief Scientific Officer at Genentech where he is responsible for directing all basic and disease research and drug discovery efforts. He also maintains his own research group focused on the wiring of the developing brain, as well as neuronal re-wiring after injury and the process of neurodegeneration.
基因打靶技术的产生
“如果你强烈地相信一个想法,有时你需要采取一些风险去追求它。”这是2007诺贝尔生理学或医学奖得主之一,马里奥·卡佩奇的看法,本短片讲述他从小鼠组织培养细胞中发展基因打靶技术的历程。
RNAscope®技术原理介绍
RNAscope®®原位定量专利技术由美国新兴的分子病理领导者ACD公司(Advanced Cell Diagnostics, Inc., California, USA)开发,通过专利的双“Z”探针设计,使RNA原位杂交具有高度特异性、单分子检测的敏感性并有极高的信噪比,能够在单细胞水平同时定量多个RNA的表达,在获得单细胞中单拷贝RNA表达数据的同时提供完整的组织形态学信息,提高对疾病与标志物之间复杂的生物学相关性的认识,是理想的能够用于NGS和芯片技术后期转化研究技术平台。
自2011年技术推广以来,其应用已在如Nature、Science、NEJM等国际顶级期刊发表超过300篇SCI论文。研究涵盖了感染及免疫、肿瘤、神经生物学、干细胞及发育、非编码RNA、表观遗传学等基础医学领域,以及靶标鉴别和验证、临床前安全性评价和药效评估等药物开发研究。
请访问ACD官网www.acdbio.com。更多中文资料与信息请访问中国官方微信号(ACD_China)咨询。
将RNAscope®技术应用于病毒学的研究
Advanced Cell Diagnostics邀请了美国加利福尼亚大学(Davis)微生物、免疫及病理学系教授Patricia Pesavento,为大家介绍应用RNAscope®技术在研究新发现的病毒及致病病因、病理方面的研究。引起疾病的病毒可以跨越种族感染,通过测序发现新型病毒,利用RNAscope®进行病毒病理学分析,以准确判断疾病及复杂的宿主病毒相互影响。在这一讲座中,Pesavento教授以乳头瘤病毒等举例,对病毒的潜伏、致瘤和急性裂解细胞分析,分享了病毒学的研究进展。
RNAscope®技术可以针对任一病毒(或亚型)序列设计特异性探针,通过原位定量检测获得病毒感染、潜伏及与宿主反应的研究信息。详细信息请访问ACD官网www.acdbio.com。更多中文资料请关注中国官方微信号(ACD_China)咨询。
如何在斑马鱼完整胚胎样本中使用RNAscope®技术进行研究
整胚原位杂交是在完整胚胎和组织中研究基因时空表达模式的有力工具。但现有的实验方法无法准确的直接检测RNA,而且操作耗时,结果和蛋白表达水平不一致。新一代原位定量杂交技术RNAscope®可以在斑马鱼整胚上实现快速高效、精准定量、特异性的多重RNA原位检测。该webinar由美国ACD公司(Advanced Cell Diagnostics, Inc., California, USA)邀请德国Münster大学细胞生物学研究所Erez Raz教授实验室两位研究员Azadeh Paksa 和 Theresa Gros介绍他们利用RNAscope®技术实现斑马鱼整胚上同时原位检测3个RNA分子进行三维荧光分析。详细介绍了实验操作过程,如何优化条件,降低信噪比以及RNAscope®技术相比传统原位杂交技术的绝对优势。
ACD公司提供RNAscope®原位定量杂交专利技术和产品,详细信息请访问ACD官网www.acdbio.com。更多中文资料请关注中国官方微信号(ACD_China)咨询。
文章题目: Simultaneous high-resolution detection of multiple transcripts combined with localization of proteins in whole-mount embryos. Gross-Thebing T, Paksa A, Raz E. BMC Biol. 2014 Aug 15;12(1):55.
RNAscope原位杂交技术助力新冠病毒检测及初步结果展示
RNAscope原位杂交技术助理新冠病毒检测及初步结果展示 1. RNAscope技术原理介绍 2. 在Zika,MERs-Cov,HIV等病毒研究中的应用实例 3. RNAscope应对新冠病毒研究的相关产品及结果展示
裴端卿:干细胞技术带来延长生命的可能
本期节目主要内容: 听说,世界上有这么一位科学家,在中国研究人类“长生不老”的秘密。他就是中国科学院广州生物医药与健康研究院院长裴端卿。2013年,他与他的团队从尿液里找到“不老泉”,成功提取稳定的多能干细胞,并成功地培育出了人类的再生牙齿。还想知道更多关于生物细胞学的知识吗?敬请关注本期节目。
GE:层析技术在病毒性疫苗中的应用策略
内容主要会覆盖目前中国市场疫苗现状,为了提高疫苗的质量标准,大多数厂家都开始对传统疫苗工艺进行升级换代,又或是选择更高效安全的层析方式进行抗原纯化,尤其是病毒性疫苗又有着通用性的策略,从而达到简化工艺流程,缩短工艺时间,提高疫苗质量