斑马鱼显微注射技术

采用斑马鱼做为模型的一个突出优点是对它们进行遗传操作非常方便，对它们的早期胚胎进行显微注射即可。通过这种技术，含有遗传物质或者沉默表达框架的的溶液会被注入囊胚细胞：它们是位于新受精卵卵黄上方的胚胎细胞。将遗传物质导入细胞质一般是通过直接注射囊胚细胞，或者先注入卵黄再通过细胞质的自然流动导入囊胚细胞。成功的遗传学操作会带来一定数量的胚胎表型，用于阐明其发育的遗传学机制。

本短片介绍了斑马鱼胚胎的显微注射。我们将先回顾该技术的基本工具，包括注射装置和显微注射器，它可以通过空气压力脉冲来控制液体的流动。然后会阐述重要的准备工作，例如灌制琼脂板，用以在注射过程中稳定胚胎，以及校正显微注射装置。接下来我们会展示显微注射过程包括什么时候在什么部位注射等实验技巧。最后，我们会讨论显微注射技术的应用，包括通过mRNA注射获得基因过量表达，通过注射反义吗啉环寡核苷酸来沉默基因，以及利于经过特殊基因工程操作的质粒DNA产生转基因斑马鱼。