免疫细胞治疗技术
免疫细胞治疗技术（CIK）细胞制品制备的质量控制，
一、学科基本情况-基础科研平台：
拥有两个细胞培养室，其中一个用于第三类医疗技术相关细胞 制品临床前的中试试验；
二、GMP洁净室情况-硬件设施；
三、研发技术团队；
四、细胞制品质量控制；
五、细胞制品质量标准；
六、细胞制品放行条件
七、制备记录及原始数据管理
八、现有数据资料初步总结
免疫细胞治疗癌症的基础和临床研究
肝癌是危害人类健康的重大疾病，
一、肝癌是全球第3位癌症死因，在我国更高据第2位
二、外科手术是最早期肝癌最有效的治疗手段，但手术切除率仅占20%-30%，且术后绝大部分均在5年内复发
三、化疗、放疗和中医中药等治疗手段疗效不够理想
四、中晚期肝癌尚无有效治疗方法
袁振刚：肿瘤免疫细胞治疗 —转化医学新阵地
癌症严重威害人类健康，已成为我国人民健康的头号杀手，且伴随着老龄化愈演愈烈。传统癌症治疗手段（手术、放化疗）各有弊端，治愈率已到瓶颈。
癌症靶向治疗陷入困境，投入大产出小，而癌症免疫治疗时代已经来临，成为根治癌症的新希望。
免疫治疗是理想的癌症疗法，能正确区分癌细胞与正常细胞，特异、高效杀伤癌细胞，具有研发速度快、成本低的特点，符合转化医学策略。
经过多年的研究实践，我们建立了完善的免疫细胞治疗临床应用体系，获得细胞治疗临床应用批文，并取得可喜的治疗效果。针对免疫细胞治疗面临的三大问题，通过转化医学研究手段，建立了较为完善的技术储备：1、T细胞高效感染与外源基因表达平台；2、高免疫活性个体化治疗方案制定体系；3、高效肿瘤特异性CTL扩增技术体系；4、克服肿瘤微环境的T细胞修饰技术体系。
最后，我们集医疗、科研、生产为一体建立了上海细胞治疗工程技术研究中心的发展平台， 为细胞治疗的产业化开发奠定基础。
徐迎新：免疫细胞工程技术与抗肿瘤绿色医疗模式的建立
徐迎新，现为301医院普通外科研究所副所长，全军普通外科医疗专科中心副主任。长期从事创伤、休克、脓毒症及多器官功能障碍综合症发病机制和防治研究。
尽管科学技术的发展日新月异，各国政府在生命科学领域的投入不断增加，但对于恶性肿瘤的治疗一直未能突破。从1975年到2005年这30年间，肿瘤的总体死亡率并没有发生太大的变化。人们不禁要问为什么许多肿瘤病人经历了手术、化疗、放疗所带来的种种痛苦，付出了昂贵的医疗费用，却未能明显地延长生命。肿瘤病人的希望在哪里？
肿瘤是一种慢性疾病，全身性疾病，且为多基因改变，其实质是体内突变细胞与免疫细胞之间的一场内部战争，二者的博弈贯穿医疗过程的始终，也决定了该个体的生存与否。同时人体局部的微环境，整体内环境，外部自然环境以及社会心理因素都对肿瘤的发生和预后产生重大影响。因此，恶性肿瘤决不是手术可以切的干净，放、化疗可以根治的。为探索新的医疗模式，本研究团队在国家“863”计划、国家自然科学基金和企业资金的资助下，经过十余年的探索和研究，以免疫细胞工程技术为切入点，并成功进行临床转化，走出了一条绿色抗癌的新路。
1．建立肿瘤疫苗及多种人体免疫细胞(肿瘤抗原致敏DC、靶向肿瘤干细胞DC疫苗、DC诱导特异性T细胞、肿瘤浸润T细胞、引流区淋巴结T细胞、NK、CIK和B细胞)制备与体外扩增技术的研究与临床应用平台，以及适用于免疫细胞过继转移的疗效评价体系。在临床应用中不断进行打破DC耐受，降低Treg，抑制炎症反应等方面研究，以提高免疫细胞过继转移治疗的疗效。
2． 我们尝试的抗肿瘤绿色医疗模式基于对肿瘤局部的积极处理与全身抗肿瘤免疫功能恢复/重建并举的理念，综合运用常规手术、各种微创技术、细胞工程技术、化疗和放疗。对于一位初诊肿瘤患者，首先进行个体化总体治疗方案的顶层设计，然后分步实施，系统跟踪。1）通过外科及其它微创技术，或适当方式与剂量的放疗，最大限度减少肿瘤负荷。2）术前抽血大规模扩增免疫细胞，术中留取肿瘤组织制备DC疫苗，术后全身创伤炎症反应过后免疫低下时，亦是干细胞及大量细胞因子（IL-1/IL-6/EGF/VEGF/TGF-等，往往促进肿瘤生长）释放，进行组织修复时，尽早开始多种免疫细胞联合输注，保护和调动预存免疫功能，加强免疫监视，清除残留肿瘤细胞。3）其后对敏感的病种适当化疗，清理脉管中残留肿瘤细胞；降低抑制性免疫细胞亚群（调节型T细胞，Treg），及血中白细胞总数，腾留空间，为继续回输活化的免疫细胞，修复与重建自身抗肿瘤免疫功能打下基础。本团队总结了数百病例，分析了该疗法对于Ⅲ/Ⅳ期胃癌的疗效。观察到手术+化疗+免疫治疗组与传统手术+化疗组比较，中位生存期显著延长，一年和三年生存率均显著提高，并且患者生活质量明显改善。在结直肠癌患者，该疗法与传统治疗组相比，亦获得三年和五年生存率显著提高的疗效。
3．在取得上述疗效的基础上，我们进一步探索了中西医整合的系统治疗模式。由于肿瘤病人体内具有毒、瘀、痰、湿等病邪积滞的邪实因素，免疫活性细胞过继转移到体内后，如体内这些病邪不驱除，整体内环境不改善，亦不能充分和持久地发挥作用，无法修复与重建自身抗肿瘤免疫功能。因此，应尽早实施中医药内治与外治，调整机体整体内环境和局部微环境；及时进行心理辅导，帮助患者及其家属正确认识肿瘤，树立战胜疾病的信心，从心理神经免疫学的角度出发，尽可能地解除心理因素对免疫系统的抑制；指导患者采取健康的生活方式及工作态度，以及健康的膳食与营养物补充，引领患者走向康复。
本团队探索并实践的传统手段与现代生物技术相结合以及中西医整合的抗肿瘤绿色治疗模式，既遵循了中国传统医学的整体观，又发挥了西方医学与现代科技的优势，为恶性肿瘤患者所期望的减少全身性残酷治疗，改善生活质量，切实延长生存期带来了福音。
荧光免疫细胞化学检测法（ICC）- 完整
In this video, you will learn how to coat coverships, prepare cell culture plats, plate cells for ICC, fix, permeabilize, block and add a primary antibody to your plated cells, add a secondary antibody, wash the plated cells, double label and mount your coverslips for analysis.
荧光免疫细胞化学检测法（ICC）- 第1部分
In this video you will learn how to clean and coat coverslips, prepare cell culture plates, and plate cells for ICC.
荧光免疫细胞化学检测法（ICC）- 第2部分
In this video you will learn how to fix, permeabilize, block, and add primary antibody to your plated cells.
荧光免疫细胞化学检测法（ICC）- 第3部分
In this video you will learn how to add your secondary antibody, wash the plated cells, double label, and mount your coverslips onto slides for analysis.
掌控Phospho-Flow： 巧用细胞内、外流式细胞术优化免疫细胞活化分析
Since its first use in 1950s, flow cytometry has become one of the mostly powerful analysis techniques in biomedical research and clinical use to rapidly and simultaneously scrutinize multiple parameters at the single-cell level determined. Besides the use of best possible antibodies, an appropriate fixation and permeabilization protocol play critical roles in achieving successful detections from surface CD markers to intercellular modified targets such as phosphorylated proteins. This presentation, as a guideline, will share with you those important tips that CST flow-cytometry experts routinely use in their daily bench work. 自从流式细胞术在20世纪50年代首次应用以来，它已成为生物医学研究和临床应用中最有力的分析技术之一，以便在单细胞水平上快速且同时检测多个参数。除了使用经严格验证优化的抗体外，适当的固定和通透方案对于从细胞表面CD marker到细胞内修饰靶标（如磷酸化蛋白）的成功检测起着关键作用。作为指导方针，本次讲座将与您分享CST流式细胞术专家在日常的试验工作中经常使用的经验和技巧。
免疫治疗代谢检查点与肿瘤微环境中免疫细胞持久性的生物能量代谢
肿瘤免疫治疗在《科学》杂志2013 年十大科学突破中位居首位，被认为是近年来癌症治疗领域最成功的方法之一。 肿瘤免疫治疗主要分为两种：细胞免疫治疗和免疫检查点抑制剂治疗。其中免疫检查点 抑制剂是指免疫细胞会产生抑制自身的蛋白小分子，肿瘤细胞利用这种机制，抑制免疫细胞，从人体免疫系统中逃脱存活下来。免疫检查点抑制剂类药物，可解除这种抑制作用，让免疫细胞重新激活工作，消灭癌细胞。目前上市的免疫检查点抑制剂主要是CTLA-4 抑制剂和PD-1 抑制剂（PD-1/PD-L1 抑制剂），其中PD-1 抑制剂（PD-1/PD-L1 抑制剂）包括PD-1抗体（PD-1 抑制剂）和PD-L1 抗体（PD-L1 抑制剂）。 代谢程序是免疫细胞结果的上游决定因素。包括激活、增殖和记忆细胞发育在内的免疫细胞过程都是由代谢重编程驱动的，代谢重编程可以被调节以增强性能和控制免疫细胞结局。近年来，细胞分析工具的进步使人们能够更深入地了解调控策略的功能结果，从而开发出安全有效的疗法。研究人员正在利用安捷伦 Seahorse XF 技术测量动态的功能性代谢，更直接地实时测量正在发生的免疫细胞过程。 当下，我们对癌症中的代谢重编程和癌症研究中免疫代谢干预的新策略有了更深入的了解， 2023 年1 月5日，生物谷携手安捷伦聚焦“免疫治疗代谢检查点与肿瘤微环境中免疫细胞持久性的生物能量代谢”召开主题空中讲坛，邀请行业资深专家一起探讨以上问题，欢迎广大同行参与，相信将给予同行启迪。